氨基酸分析仪是一种科学仪器，主要用于测定蛋白质、肽及其他药物制剂中氨基酸的组成和含量。其工作原理主要基于阳离子交换柱分离、柱后茚三酮衍生以及光度法测定的离子交换色谱法。氨基酸分析仪的优势包括高分析效率、操作简便、应用广泛等。
氨基酸分析仪工作原理的详解：
1. 样品预处理：
- 在进行分析前，需要将蛋白质或肽样品水解成单个氨基酸。
2. 离子交换分离：
- 氨基酸分析仪使用装有阳离子交换树脂的色谱柱。当样品中的氨基酸混合物在流动相(缓冲溶液)的推动下通过色谱柱时，各氨基酸与树脂中的交换基团进行离子交换。
- 由于不同氨基酸的交换能力不同，使用不同pH值的缓冲溶液进行洗脱可以实现氨基酸的分离。
3. 柱后衍生反应：
- 分离的氨基酸与茚三酮试剂反应生成紫色或黄色化合物。这一步骤称为柱后衍生。
4. 光度法定量测定：
- 衍生后的氨基酸用可见光检测器在特定波长(如570 nm或440 nm)下检测吸光度。
- 根据朗伯-比尔定律，有色产物的吸收强度与氨基酸浓度之间存在线性关系，从而实现定性和定量分析。
5. 系统优化：
- 相比普通高效液相色谱仪(HPLC)，氨基酸分析仪针对氨基酸分析进行了细节优化，如氮气保护、惰性管路、在线脱气、洗脱梯度及柱温梯度控制等。
6. 两种系统：
- 细分为蛋白水解分析系统(钠盐系统)和游离氨基酸分析系统(锂盐系统)。
- 钠盐系统适用于快速分析约25种以内的氨基酸，而锂盐系统则能分析约50种氨基酸但速度较慢。
氨基酸分析仪的优势：
1. 高分析效率：
- 可以同时处理多批试样，大幅度提高实验室工作效率。
2. 操作简便：
- 自动化程度高，自动完成进样、分离、检测等步骤，减轻实验人员负担。
3. 应用广泛：
- 适用于生物化学研究、医药研发、农业、食品工业等多个领域。
4. 高灵敏度与准确性：
- 能够精确测定微量氨基酸含量，满足高分辨率分析要求。
5. 数据可易于处理：
- 原始数据易于计算机处理，方便进一步分析与评估。
6. 无需衍生化：
- 某些方法不需要对氨基酸进行柱前或柱后衍生，简化了操作步骤。
